高壓蒸汽滅菌是利用高壓和高熱釋放的潛熱進行滅菌。原理是在密閉的容器中，水的沸點因為蒸汽壓力增大而升高，以此提高蒸汽的溫度，用來進行有效滅菌。高壓蒸汽滅菌器在使用時，一定將滅菌器中的冷空氣排除干凈。因為空氣的膨脹壓力大于水蒸氣的膨脹壓力，當水蒸氣中含有空氣時，壓力表上所示的壓力不是水蒸氣的實際壓力，而是水蒸氣壓力和空氣壓力的和。因為在相同的壓力下，含空氣的蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度，所以當滅菌器加熱達到需要的滅菌壓力時，如果含有空氣，滅菌器內達不到所需的滅菌溫度，就達不到應有的滅菌效果。

每日檢查：

1.檢查排氣口過濾網有無阻塞，每周一取出清洗。

2.檢查門框與橡膠墊圈有無損壞、是否平整。

3.檢查壓力表在蒸汽排盡時是否達到零位。

4.每天進行滅菌器門、儀表的表面擦拭，滅菌間地面清潔至少一次。

5.按下按鈕，將門打開，讓滅菌器冷卻，清洗前應讓滅菌器冷卻，為防止開關鑰匙無意中插上復位，負責清洗的人員，如工作時無法看到開關，則應該將鑰匙隨身攜帶。